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GE Whatman滤纸在牙科口腔科领域的应用
点击次数:797 发布时间:2018-09-03

1、龈沟液(GCF)的收集及处理分别预备4 条2 mm×10 mm 3MM 滤纸条(Whatman,英国)放入已编号的Eppendorf 管中,取样前半小时用AE 240 电子天平
称重并记录。受试者漱口、隔湿取样牙,去除龈上菌斑和牙石,轻轻吹干牙面。每颗牙4 个取液区,将滤纸条插入唇舌侧(中央)和近远中(从唇侧斜向插入)
龈沟中,直至遇到轻微阻力为止,30 s 后取出,立即放回原Eppendorf 管中。若被唾液或者血液污染则重取。再次用电子天平称重,两者之差即为GCF 的
质量。称重后将Eppendorf 管封口,放入低温冰箱内,-70 ℃保存。样本测试前解冻,按所得差值用去离子水稀释100 倍后,以13 000 r /min 低温离心20
min,取上清液备测。
2、比较whatman3MM层析滤纸和whatman3#定性滤纸在收集龈沟液及蛋白萃取方面的性能,为临床研究中选用合适滤纸采集龈沟液提供实验依据。方法:A组用whatman3MM层析滤纸,B组用whatman3#定性滤纸,手工裁剪成2mm×8mm大小的滤纸条。2组分别加入15个体积递增的血清品红溶液,同体积重复4次,测量每张滤纸条上的溶液浸润长度。2组分别加入5个体积递增的正常人血清,同体积重复5次,测定各组萃取液的总蛋白浓度;A、B 2组分别加入用0.9%NaCl溶液等倍稀释获得的5种浓度的正常人血清溶液1μL,同浓度重复5次,测定各组萃取液的总蛋白浓度。使用SPSS17.0软件包进行统计学分析,比较两者差异。结果:2组溶液浸润长度与溶液体积均呈现良好的线性关系,差异有显著性(P0.05)。除体积为0.1μL时,A组滤纸条上的溶液平均浸润长度均大于B组。蛋白萃取性能比较中,2组无显著性差异(P0.05)。结论:2种滤纸均可对龈沟液在滤纸条上的迁移距离及其所采集的龈沟液进行定量。当龈沟液分泌量较大时,whatman3#定性滤纸较3MM层析滤纸更为适用。两者的蛋白萃取性能无显著差异。 

3、牙周袋临床指标和龈沟液的测定: 由同一名医师完成术前、术后的每次临床检查,用标准刻度探针测定牙周袋深度,所有探诊检查均使用Michigan 探诊,牙周袋深度取测定牙的颊侧近中、中央、远中及舌侧中央的牙周袋深度均值,在隔湿,吹干后用Whatman 号滤纸制成2 mm ×20 mm 的滤纸条插入牙周袋内2 min ,取出后用游标卡尺测量其浸润面积,换算成龈沟液量。 

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