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赛多利斯超滤离心管你知道吗?
点击次数:144 发布时间:2019-10-09

赛多利斯超滤离心管

超滤
超滤是通过超滤膜实现的;这种膜具有方向异性,表现为表层致密,深层疏松的特点;根据超滤膜本身的孔径,可以分离相应的大分子和溶剂。在超滤的过程中,溶剂和盐类透过超滤膜,而大分子则因为被截留而得到浓缩。并且超滤还可以用来进行溶剂置换。通过多次的浓缩和添加目标溶剂,就可以逐步完成目标溶剂的替换,从而取代了冗长的透析步骤。尽管超滤并非分离/分馏不同大分子的标准方法,但在某些情况下仍可以运用,如不同大分子的分子量相差至少10倍以上。
超滤是一种温和的方法,不会引起大分子的变性,因此比其他的方法更加有效,适应面更广。
超滤的方法:
赛多利斯提供了各种各样的超滤方法,供您在浓缩生物学样品时使用。下面列举了超滤产品的选型指南,您可以结合样品体积,可用的设备,以及期望的超滤速度和过程控制等因素来选择最适合的产品
 

-离心浓缩:
(处理体积:100ul-100ml)
过膜压力由离心力提供,在离心力的作用下,溶剂和小分子的物质将通过超滤膜,进入下游滤出液收集器中。这是一个温和的过程,可快速装配,并且比多数其他方法实现更快的过滤速度。
赛多利斯提供了多种产品,包括7种vivaspin®系列产品,2种vivacell®产品和1种centroSart®I,这些产品可用于蛋白浓缩,同时也有vivacon®系列产品用于DNA浓缩和多肽的浓缩与分离。
 

-加压超滤
(处理体积:5ml-250ml)
过膜压力过膜压力由压缩空气或压缩惰性气体提供。为了得到最快的超滤效果,加压后的vivacell®产品可以放置在实验室摇床上。摇床的震荡,避免了大分子沉积在膜表面形成的浓差极化现象,从而维持了超滤流速。Vivaspin®20,Vivacell® 70, Vivacell® 100 and Vivacell® 250这四种产品可以带
压使用。
加压离心是赛多利斯独特的超滤方式,该方式集合了加压超滤和离心超滤的优点,因此超滤的速度在所有方法中最快。
通常,该方法比离心的方法要快30%-50%。Vivaspin®20和Vivacell®70可以进行加压离心的操作(初始体积:5-50ml)。
 

-切向流
(处理体积:100ml-5L)
在蠕动泵的作用下,样品流经超滤膜,又回流到样品容器中;在切向流设备的回流出口位置安装限流装置,以此提高超滤膜表面受到的压力;此时,超滤膜受到的切向压力就是过膜压力。在过膜压力的作用下,溶剂和小分子的物质穿过超滤膜进入到滤出液收集容器中。可重复使用的Vivaflow® 50R和
Vivaflow®200以及一次性使用的Vivaflow®50,是目前市面上专门为实验室应用而设计开发的切向流超滤膜包。

-静态吸附
(初始体积:3ml-20ml)
这种技术,是在超滤膜的后方填充强吸附性的纤维素,在这些纤维素的吸附作用下,溶剂和小分子的物质透过超滤膜被吸收,从而使被截留的大分子得到浓缩,并集中在了样品池的底部;在这里,纤维素的吸附力提供了过膜压力。这种方法不需要任何其他的设备,因此是临床应用的理想选择,例
苹果彩票注册如,在进一步分析之前,对尿液进行浓缩。静态吸附的产品有Vivapore®5和and Vivapore®20可供选择。

超滤的典型应用

  • -浓缩/脱盐、适用于蛋白、酶类、DNA、单克隆抗体、免疫球蛋白、病毒和纳米颗粒
  • -在毛细管电泳之前,对尿液中本周氏蛋白(Bence Jones Protein,BJP)进行浓缩
  • -司法鉴定中,在链式反应之前,对DNA进行浓缩
  • -基于滤膜的样品制备(filter-based sample preparation,FASP)-多肽的分离
  • -游离型药物/激素的分析
  • -从PCR扩增后的DNA中去除引物;
  • -去除标记氨基酸和标记核苷酸
  • -去除样品中的蛋白质
  • -实验室常规的浓缩和脱盐、包括蛋白、酶类、DNA、生物分子、病毒、抗体和免疫球蛋白

Process Optimization
超滤过程的优化
某些情况下,必须追求zui高的回收率,例如,目标溶质处于微克级别,赛多利斯推荐您考虑如下措施来获得zui佳的超滤效果:

  • -根据目标分子量,选择尽量低的MWCO。为得到zui高的回收率,MWCO应至少在目标溶质分子量的一半以下;
  • -避免过度浓缩。最终体积越小,就越难以达到完全的回收率。如果可行,在最初浓缩之后,使用一滴或数滴缓冲液冲洗浓缩装置,再进行回收;
  • -对超滤装置进行预处理;使用蒸馏水配制钝化溶液,例如5%的SDS,Tween 20 或Triton X,将超滤装置浸泡过夜,使用前彻底清洗即可使用。
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